RBP1L1, una proteína ligada al retinoblastoma relacionada al gen de codificación del epítope antigénico expresado de manera abundante en carcinomas humanos y testículos normales

En este estudio, hemos utilizado una inmunoglobulina G (IgG) purificada a partir del suero de pacientes con cáncer de mama para identificar su epítope, gen y proteína (proteína 1 tipo proteína 1 ligada al retinoblasma) correspondiente y para determinar si esta es un potencial marcador molecular para varios cánceres.

Métodos:

La IgG purificada a partir del suero de pacientes con cáncer de mama fue utilizada para rastrear la expresión del ADN complementario (cDNA) de las células MCF-7 de cáncer de mama para clones inmunorreactivos. Los cDNAs identificados fueron clonados y secuenciados. La inmunorreactividad a aminoácidos específicos en el epítope fue determinada a través de un análisis Western y un ensayo inmunoabsorvente ligado a enzima. La ubicación celular del antígeno fue determinada a través de un colorante de inmunoperoxidasa con la IgG específica de la RBP1L1 purificada.  La expresión del gen en varios carcinomas humanos y en tejidos normales fue examinada a través de un análisis Northern y de la reacción en cadena de la polimerasa de transcripción inversa.

Resultados:

Nuestra IgG purificada reconoció solo un epítope en la RBP1L1. El cDNA de la RBP1L1 de base 5802 codifica la proteína aminoácida 1226 que contiene el epítope antigénico IKPSLGSKK. La secuencia proteínica derivada de la RBP1L1 comparte un 74% y un 37% de identidad aminoácida, respectivamente, con una secuencia parcial de la proteína ligada al retinoblasma y con la secuencia completa de la proteína 1 ligada al retinoblasma. El epítope de la RBP1L1 fue localizado en el citoplasma de las células MCF-7 pero no fue detectado en las células sanguíneas mononucleares periféricas.  La expresión alta del ARN mensajero de la RBP1L1 fue encontrada en cánceres humanos de mama, de pulmón, de colon, pancréaticos y ováricos y en testículos normales, pero la expresión estuvo limitada en otros tejidos normales.

Conclusión:

La RBP1L1 parece ser un marcador molecular asociado a un amplio rango de neoplasias humanas.