Reacción en cadena de polimerasa múltiple para detectar uveitis posterior infecciosa

Objetivo:

Validar un experimento de reacción en cadena de polimerasa múltiple (PCR) capaz de detectar simultáneamente en diversas muestras de biopsias vítreas un panel de patógenos comunes en la uveitis posterior.

Método:

Se desarrolló un experimento de PCR múltiple que utilizando pequeñas secuencias de oligonucleótidos para citomegalovirus (CMV), virus del herpes simple (HSV), virus de la varicela zoster (VZV) y Toxoplasma gondii. Se determinó la sensibilidad del experimento para el ADN patógeno purificado. Se evaluaron un total de 21 muestras de vítreos, a través de PCR múltiple así como por PCR simple, provenientes de pacientes con uveitis posterior.

Resultados:

Utilizando los nuevos conjuntos de pequeñas secuencias de oligonucleótidos pudieron ser detectados un poco menos de 10 genomas de VZV y menos de 100 genomas de HSV, CMV y T gondii.  Cuando se utilizó en múltiple, el experimento perdió menos de 1 log de sensibilidad. El PCR simple detectó ADN patógeno en 18 de las 21 muestras de los pacientes. El PCR múltiple detectó ADN patógeno en 15 de 18 muestras positivas por PCR simple. Ninguna de las 10 muestras negativas usadas como control fue positiva para el ADN patógeno.

Conclusiones:

El PCR Múltiple posee una adecuada sensibilidad para detectar simultáneamente un diagnóstico diferencial substancial para uveitis posterior en una reacción simple, sin pérdida de especificidad. Este experimento podría reducir el tiempo y el costo involucrados en los diagnósticos moleculares basados en PCR de patógenos infecciosos.

Relevancia Clínica:

La PCR múltiple podría permitir el diagnóstico de uveitis posterior infecciosa.