Endoftalmitis post quirúrgicas por Staphylococcus Epidermidis

El presente estudio se realizó en 32 cepas de S. epidermidis aislados de endoftalmitis post-quirúrgicas. También fueron estudiadas 30 cepas de S. epidermidis aisladas de conjuntiva de voluntarios sanos.

Todas las cepas aisladas fueron caracterizadas por métodos de microbiología clásicos. Se determinó la presencia de icaA, icaD, y mecA, por un método de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). El ADN genómico que se utilizó para las PCRs se obtuvo de colonias bacterianas aisladas y  se preparó por lisis bacteriana. Se amplificaron regiones específicas de icaA, icaD y mecA utilizando primers o cebadores previamente (11, 12). Como control interno de amplificación se utilizaron primers dirigidos al ARNr 16S del S. epidermidis (13). Los productos de la PCR  fueron separados en un gel de agarosa al 2% y visualizados con bromuro de etidio. Se utilizaron las condiciones de ciclado y detección de los productos de amplificación descriptos (11-13). Se introdujeron controles negativos y positivos en todas las amplificaciones. Todos los procedimientos fueron realizados con pipetas de desplazamiento positivo y bajo flujo laminar para minimizar la contaminación.

La producción de biofilm o slime de todas las cepas fue estudiado por cultivo en agar Rojo Congo (ARC) (14). Las placas con ARC (0,8 gramos de rojo congo y 36 gramos de sacarosa en 1 litro de agar cerebro-corazón) fueron incubados 24 horas a 37 °C y luego a temperatura ambiente durante toda la noche. En ARC, las cepas productoras de slime forman colonias negras, mientras las que no producen desarrollan colonias rojas.