Estudian fármacos para combatir la infección por coronavirus

En diciembre de 2019, una nueva neumonía causada por un patógeno previamente desconocido surgió en Wuhan, una ciudad de 11 millones de personas en el centro de China. Los casos iniciales estaban relacionados con exposiciones en un mercado de mariscos en Wuhan.1

A partir del 27 de enero de 2020, las autoridades chinas informaron 2835 casos confirmados en China continental, incluidas 81 muertes. Además, se identificaron 19 casos confirmados en Hong Kong, Macao y Taiwán, y se identificaron 39 casos importados en Tailandia, Japón, Corea del Sur, Estados Unidos, Vietnam, Singapur, Nepal, Francia, Australia y Canadá.

El patógeno pronto se identificó como un nuevo coronavirus (2019-nCoV), que está estrechamente relacionado con el síndrome respiratorio agudo grave CoV (SARS-CoV).2

Actualmente, no existe un tratamiento específico contra el nuevo virus. Por lo tanto, es urgente identificar agentes antivirales efectivos para combatir la enfermedad.

Un enfoque eficiente para el descubrimiento de fármacos es probar si los fármacos antivirales existentes son efectivos en el tratamiento de infecciones virales relacionadas. El 2019-nCoV pertenece al grupo de Betacoronavirus que también contiene al SARS-CoV y al virus del Síndrome Rspiratorio del Medio Oriente CoV (MERS-CoV).

Se han usado varios medicamentos, como ribavirina, interferón, lopinavir-ritonavir, corticosteroides, en pacientes con SARS o MERS, aunque la eficacia de algunos medicamentos sigue siendo controvertida.3 En este estudio, evaluamos la eficacia antiviral de cinco medicamentos aprobados por FDA incluyendo:

1.    Ribavirina
2.    Penciclovir
3.    Nitazoxanida
4.    Nafamostat
5.    Cloroquina

Y dos medicamentos antivirales de amplio espectro conocidos remdesivir (GS-5734) y favipiravir (T-705) contra un aislado clínico de 2019-nCoV in vitro

En primer lugar, la citotoxicidad de los compuestos candidatos en las células Vero E6 (ATCC-1586) se determinó mediante el ensayo CCK8. Luego, las células Vero E6 se infectaron con nCoV-2019BetaCoV / Wuhan / WIV04 / 20192 a una multiplicidad de infección (MOI) de 0.05 en presencia de concentraciones variables de los fármacos de prueba. Se usó DMSO en los controles.

La eficacia se evaluó mediante la cuantificación de los números de copias virales en el sobrenadante celular mediante RT-PCR cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR) y se confirmó con la visualización de la expresión de la nucleoproteína del virus (NP) mediante microscopía de inmunofluorescencia a las 48 h después de la infección (pi).

Entre los siete medicamentos probados, altas concentraciones de tres análogos de nucleósidos, incluida la ribavirina (concentración efectiva semi-máxima (CE50) = 109.50 μM, concentración semicitotóxica (CC50)> 400 μM, índice de selectividad (SI)> 3.65), penciclovir (CE50 = 95.96 μM, CC50> 400 μM, SI> 4.17) y favipiravir (EC50 = 61.88 μM, CC50> 400 μM, SI> 6.46) fueron necesarios para reducir la infección viral).

Sin embargo, se ha demostrado que el favipiravir es 100% efectivo en la protección de ratones contra la exposición al virus del Ébola, aunque su valor de CE50 en las células Vero E6 fue tan alto como 67 μM, lo que sugiere que se recomiendan más estudios in vivo para evaluar este nucleósido antiviral.

Nafamostat, un potente inhibidor de MERS-CoV, que previene la fusión de la membrana, fue inhibidor contra la infección 2019-nCoV (EC50 = 22.50 μM, CC50> 100 μM, SI> 4.44).

La nitazoxanida, un agente antiprotozoario comercial con un potencial antiviral contra una amplia gama de virus, incluidos los coronavirus humanos y animales, inhibió el 2019-nCoV a una concentración micromolar baja (CE50 = 2.12 μM; CC50> 35.53 μM; SI> 16.76). Se recomienda una evaluación adicional in vivo de este medicamento contra la infección 2019-nCoV.