Tiazolidas, una nueva clase de moléculas antigripales

Introducción

El agente etiológico de la gripe es el Orthomyxovirus, de cuyos tipos el más importante es el A. El genoma del tipo A consiste de 8 cadenas simples de segmentos de RNA que codifican a 11 proteínas, incluyendo las glucoproteínas de superficie hemaglutinina y neuraminidasa.

La infección del virus de la gripe posee varios pasos: el virus se fija a las glucoproteínas del huésped por medio de la hemaglutinina viral e ingresa en la célula por endocitosis, seguido de una fusión que es pH dependiente con liberación en el citoplasma de complejos de proteína ribonuclear genómica. Seguidamente la proteína ribonuclear genómica se transloca al núcleo produciéndose la transcripción y replicación del RNA viral. Durante el ciclo de replicación algunas proteínas virales se translocan al núcleo para formación de la progenie, mientras que las proteína hemaglutinina, neuraminidasa y M2 alcanzan la membrana celular a través de las vías secretoras, lo cual constituye un mecanismo esencial para la formación de la partícula viral y la gemación a partir de la célula huésped.

En los seres humanos, el virus de la gripe A se replica a lo largo del árbol respiratorio. El curso de la gripe se autolimita y dura alrededor de una semana, pero puede oscilar entre una forma vanal hasta una neumonía mortal. Un factor importante que determina la evolución de la gripe es la inflamación excesiva producida por citoquinas proinflamatorias.

Las glucoproteínas hemaglutinina y neuraminidasa, que constituyen los principales blancos de la respuesta inmunitaria protectora, varían continuamente. La ausencia de inmunidad protectora contra nuevas proteínas hemaglutinina y/o neuraminidasa produce una diseminación rápida del virus como sucede con el virus A H1N1 de la gripe porcina. De ahí la necesidad de nuevos agentes antivirales.

Este artículo documenta la actividad antigripal de la nitazoxanida (NTZ), una tiazolida aprobada en Estados Unidos para tratar la gastroenteritis infecciosa.

Procedimientos experimentales

Cultivo celular, tratamiento y transfección. En medios especiales se cultivaron células de riñón de perro y de epitelio humano. Se agregó a los medios de cultivo NTZ y tizoxanida (TIZ), que son tiazolidas de segunda generación. Los cultivos controles recibieron igual cantidad de vehículo que no afectó la viabilidad de las células ni la replicación del virus. Se realizaron experimentos de transfección.

Preparación del virus, infección y titración. Se emplearon 4 tipos diferentes de virus de mamíferos y de aves: H1N1 A/PR/8/34 (PR8) and A/WSN/33 (WSN), que fueron introducidos en los cultivos celulares.

Resultados

Actividad antiviral de las tiazolidas ante las diferentes cepas de virus A. Se observaron los siguientes resultados:

• El tratamiento con NTZ produjo una inhibición dosis-dependiente de la replicación del virus. La TIZ fue igualmente activa contra todas las cepas de virus de la gripe A.

• En concentraciones antivirales eficaces, ninguna de las dos tiazolidas fue citotóxica en las células no infectadas o controles.

• El tratamiento con TIZ iniciado entre la 0 y 3 horas post infección fue el más eficaz para inhibir la replicación del virus.

• Las tiazolidas alteraron en forma selectiva la maduración viral de hemoaglutininas.

• La TIZ inhibe el transporte de hemaglutininas hacia la membrana celular y previene la salida del virus de las células huésped. Se comprobó una reducción sustancial en los niveles de hemaglutininas en la membrana plasmática después del tratamiento con TIZ.